您现在的位置:主页 > 香港红姐彩色主图库 > 正文内容

器官培养(精)

发布日期:2019-09-28 21:37   来源:未知   阅读:
 

  植物组织培养学 第3章 器官培养 大 家 好 ! 第3章 器官培养 第3章 器官培养 ?本章主要内容 ?根的培养 ?茎尖的培养 ?叶的培养 第3章 器官培养 本章教学目的与要求 (1)一般掌握离体根培养的取材部位和培养基的选 择; (2)掌握茎尖培养的种类和操作步骤; (3)掌握茎段培养中材料的选择、处理及培养基的 调整; (4)掌握离体叶片的培养步骤; (5)一般掌握胚胎培养的类型与各自的注意事项。 第3章 器官培养 器官培养的定义: 指植物某一器官的全部或部分或器官 原基的离体培养,包括根、茎、叶、花、 果实、种子等 研究器官的功能、分化、形 态建成; 快速繁殖; 获得脱毒苗 种质保藏等 培养目的: 第3章 器官培养 第一节 根的培养 根培养的意义: 1) 是进行根系生理研究的最优良实验体系; 2) 是研究器官分化、形态建成的良好体系; 3)可建立快速生长的根无性系。 第一节 根的培养 一、离体根的培养方法: 1、培养无菌苗 2、切取1.0cm的根尖 3、接种在White培养基或1/2MS培养基中暗培养 4、一周后,取侧根扩大培养,可得到离体根的 无性系 二、培养基: ? ? 无机离子较低的White培养基 或者2/3或1/2的MS、B5培养基 第一节 根的培养 三、影响离体根生长的因素 1、基因型 5、环境条件 4、pH 影响因素 2、培养基 3、生长物质 第二节 茎尖的培养 第二节 茎尖的培养 一、含义及意义 1、类型 茎尖分生组织培养:对长度0.1mm左右,含1-2 个叶原基的茎尖进行培养,目的是获得无病毒 植株 普通茎尖培养:对几毫米至几十毫米长的茎尖、 芽尖及侧芽的培养,目的是快速繁殖。 ? 第二节 茎尖的培养 2、茎尖培养的意义 ? ? ? 无性系快速繁殖; 培养无病毒苗,品种改良; 理论基础研究。 蝴蝶兰腋芽萌发 第二节 茎尖的培养 二、茎尖培养的一般方法 ? ? ? ? (一) 制备外植体 取1-2cm的枝条顶梢,去小叶---消毒---解剖镜下用解 剖刀除去幼叶和叶原基,露出生长点,切下0.1-0.2mm 长的茎尖(含1-2个叶原基) (二)培养基:一般为MS (三)培养方法: 1、固体培养法:试管培养 第二节 茎尖的培养 2、纸桥培养法 含义:用酒杯状的滤纸代替琼脂,使杯底朝上塞 入试管中,与液体培养基接触,将离体茎尖置 于滤纸上方进行培养。 优点:培养基是液体培养基,营养物质 能通过滤纸均衡而持久地供给外植体, 有利于外植体的健康成长 ; 缺点:操作工艺复杂 。 三、茎尖分生组织培养与脱毒 ?见第八章 植物脱毒技术 第二节 茎尖的培养 四、普通茎尖培养与繁殖技术 概念: 快速繁殖 ( 微繁殖 ): 用组织培养的方法, 使植物的部分器官、组织迅速扩大培养,繁殖出 大量幼苗的繁殖方法。大丰收心水高手论坛, 特点:繁殖速度快;使用材料少,生产效率高, 省时省工;节约空间有利于工厂化生产;不受病 虫害侵害。 ? ? 第二节 茎尖的培养 (一)茎尖微繁技术的过程:分5个阶段 ? 1、无菌培养体系的建立、 ? 2、芽的增殖 ? 3、中间繁殖体的增殖 ? 4、诱导生根 ? 5、试管苗的移植 第二节 茎尖的培养 1、无菌培养体系的建立 外植体的制备 培养基 培养条件 初代培养建立的无性繁殖系包括: 茎梢、芽丛、胚状体和原球茎等。 第二节 茎尖的培养 2、芽的增殖 (1)顶芽和腋芽的发育 ? ? ? 顶芽、侧芽生长,形成一个微型的小灌木丛状的 丛生苗结构。 丛生苗的每个枝条转接继代,可迅速获得多数的 嫩茎。这种繁殖方式称作微型扦插或无菌短枝扦 插 优点:不经愈伤组织,所以最能使无性系后代保 持原品种的特性。 图示茎段培养过程 健康植株上选健壮的枝梢 去叶片用水冲洗茎段 0.1%升汞 75%酒精1分钟 植株再生 培养 1%次氯酸钠 第二节 茎尖的培养 (2)不定芽的发育 不定芽产生的途径: ? ? 外植体上直接产生 由外植体诱导的愈伤组织上产生。 外植体 脱分化 愈伤组织 再分化 器官原基 第二节 茎尖的培养 3、中间繁殖体的增殖 由第二阶段芽的增殖产生的数量有限的芽、苗、 原球茎称为中间繁殖体。 将之转接到新鲜的相同培养基上进行继代培养, 3-4周转接一次,扩大培养。 ? ? 第二节 茎尖的培养 茎的培养发育方向 ?腋芽萌发 ?脱分化后产生胚状体(原球茎) ?脱分化后直接产生不定器官 ?脱分化后形成愈伤组织 第二节 茎尖的培养 4、壮苗和生根 壮苗目的:使增殖的嫩枝生根产生小植 株,以便移栽。 第二节 茎尖的培养 试管苗生根的措施 ? ? ? ? ? ? 用White、1/2或1/3MS、B5等生根培养基。 降低N,P,K盐的量。 适当加大生长素(如NAA),不用或少用细胞分 裂素,或在无激素的培养基上生根。 蔗糖降低到1.0-1.5%,以增强植株自养能力; 加入1%左右的活性炭; 增加光强度,以提高小植株的光合能力。 (二) 影响茎尖培养微繁殖的因素 ? ? ? ? ? ? ? ? 基因型 外植体的大小 供试植株的生理状态 芽在植株上的部位 供试植株的年龄 培养基 褐变 玻璃化 第3章 器官培养 第三节 叶的培养 一、定义: 离体叶的培养是指包括叶原基、叶柄、 叶鞘、叶片、子叶等叶组织的无菌培养。 第三节 叶的培养 叶培养的意义: ? 1、是研究叶形态建成、光合作用、叶绿素形 成的好方法 ? 2、通过叶组织的脱分化与再分化以证实叶细 胞的全能性 ? 3、通过叶组织培养,探索离体叶组织培养的 条件和影响因素 ? 4、建立体细胞快速无性繁殖体系 ? 5、叶细胞培养物经诱变筛选突变体。 第三节 叶的培养 二、叶组织培养的方法 1、制备外植体: 幼嫩叶片---水洗---消毒--- 无菌水洗。 2、影响培养因素: 1)6-BA和KT利于芽的形成;2,4-D利于愈伤组织形成。 2)极性:叶片腹面向上放置利于芽的分化 3)损伤:常从叶柄、叶脉的切口处形成愈伤组织和芽。 第三节 叶的培养 三、离体叶组织中再生植株发生途径 1、直接产生不定芽 2、离体叶 愈伤组织 3、离体叶 愈伤组织 4、离体叶 愈伤组织 不定芽 胚状体 不定芽 小鳞茎或球状体 第三节 叶的培养 叶的培养: 番茄子叶培养 烟草叶片培养 百合鳞叶培养 第3章 器官培养 本章小结: (1)植物器官培养的含义。 (2)离体根培养的方法、培养基、影响离体根生长的因素。 (3)茎尖培养的含义;茎尖培养包括普通茎尖培养和茎尖分 生组织培养。 (4)纸桥培养的含义 (5)茎尖微繁一般的过程 (6)离体叶组织脱分化和再分化中,茎和芽分化主的4个途 径 (7)试管苗诱导生根方法。 第3章 器官培养